斑點(diǎn)叉尾的病毒病及其防控方法

斑點(diǎn)叉尾的病毒病及其防控方法

陳昌福 張喜貴 孟長(zhǎng)明 王鵬帥

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，湖北 武漢 430070；2.新鄉(xiāng)市康大消毒劑有限公司，河南 新鄉(xiāng) 453700)

一、病原

病毒粒子從內(nèi)到外分別為：雙鏈DNA核酸、衣殼(capsid)、被膜(tegument)、囊膜(envelope)和糖蛋白(glycoprotein)。病毒粒子大小為175～200納米，外層囊膜內(nèi)含有一個(gè)直徑約100納米的二十面體核衣殼，由162個(gè)殼粒組成。

二、癥狀

患這種疾病的魚(yú)皮膚及鰭條基部出血、腹部、肌肉組織有許多小的出血點(diǎn)。鰓蒼白暗淡，有時(shí)有輕微的出血。鰓絲蒼白或出血，一側(cè)或兩側(cè)眼球突出；腹部膨大，部分病魚(yú)可見(jiàn)肛門(mén)紅腫外突，約有1.0%的病魚(yú)嘴部和受傷的背部會(huì)引起黃色壞死區(qū)域(圖1)。

圖1 患斑點(diǎn)叉尾病毒病的病魚(yú)

解剖檢查，肌肉、肝、腎、脾等組織有出血區(qū)，脾臟往往呈淺紅色、腫大；胃膨大，有黏液分泌物；腸灰白色等病理狀態(tài)。在病魚(yú)的體腔可以發(fā)現(xiàn)黃色和淡血色的液體。消化道無(wú)食物，但是可能充滿黃色的液體。肝和腎蒼白并且有少量的出血。脾通常是黑色并且有擴(kuò)大的現(xiàn)象。使用顯微鏡檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)病毒引起的損傷主要在腎臟，腎的分泌和造血部位可以看見(jiàn)出血和死的組織。在腹腔和別的部位，液體的積累主要由腎衰引起；同時(shí)，造血組織的破壞和出血導(dǎo)致鰓部、肝和腎的表面蒼白。脾、肝、腸道、胰腺和腦的損傷要小。炎癥細(xì)胞侵入受疾病侵襲的區(qū)域，試圖清除被損傷和感染的組織。

三、流行規(guī)律

CCV的傳播途徑有水平傳播和垂直傳播兩種。水平傳播是通過(guò)水或寄生蟲(chóng)及污染物傳播。水溫是重要的條件致病因素，暴發(fā)流行的最佳水溫為25～30℃，其中27℃時(shí)的死亡率較高，低于18℃時(shí)死亡率明顯下降甚至無(wú)死亡。此病主要流行于北美，目前我國(guó)雖然開(kāi)展大規(guī)模的斑點(diǎn)叉尾養(yǎng)殖，但由于未進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，因此該病的分布、發(fā)生情況尚不清楚。

四、診斷

根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化可作初步診斷，確診需進(jìn)一步做實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)單由PCR檢測(cè)病原陽(yáng)性結(jié)果的視為可疑。CCVD的診斷首先經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行病毒分離，然后用中和試驗(yàn)、免疫熒光、ELISA或PCR鑒定。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可取病魚(yú)腎臟和脾臟，接種到斑點(diǎn)叉尾卵巢細(xì)胞(channel catfish ovary，CCO)，在25～30℃培養(yǎng)并進(jìn)行分離病毒；也可以用免疫熒光或ELISA直接檢測(cè)病魚(yú)組織，快速診斷有臨床癥狀的魚(yú)。由于病毒僅在急性暴發(fā)期間比較容易檢測(cè)到，目前尚無(wú)適合檢測(cè)無(wú)癥狀健康魚(yú)潛在感染的最佳方法，要排除CCV的存在，在疾病繼往史和CCV血清學(xué)檢測(cè)等大量工作后才能確定。

五、防治

該病目前尚無(wú)有效的藥物治療方法，故需要以預(yù)防為主。有效防治該病應(yīng)該從以下幾個(gè)方面入手：①消毒與檢疫。消毒與檢疫是控制CCVD流行的最有效方法，采用氯制劑作為消毒劑時(shí)，有效氯含量達(dá)到20～50毫克/升時(shí)可以很好地殺滅CCV。因此，可用氯制劑加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖水體、魚(yú)體和漁業(yè)用具的消毒，同時(shí)嚴(yán)格地執(zhí)行檢疫制度，控制CCVD從疫區(qū)傳入非疫區(qū)。②避免采用感染了CCV的魚(yú)體作為親魚(yú)進(jìn)行繁殖。由于CCV感染親魚(yú)后，可通過(guò)垂直傳播感染魚(yú)苗、魚(yú)種。因此，只有選用無(wú)抗CCV中和抗體和沒(méi)有CCVD病史的親魚(yú)用于繁殖產(chǎn)卵，進(jìn)行繁殖。③降低水溫，終止CCVD的流行。在CCVD流行時(shí)，引冷水注入發(fā)病池塘，降低水溫到15℃以下，可終止CCVD的流行，達(dá)到降低病魚(yú)死亡率、減少CCVD所造成的經(jīng)濟(jì)損失的目的。④防止繼發(fā)感染。在CCVD流行時(shí)，可在餌料中添加適量的與柱狀黃桿菌敏感的抗生素，防止細(xì)菌繼發(fā)性感染而加速病魚(yú)的死亡。⑤減少應(yīng)激，給予充足的溶氧。在CCVD流行時(shí)，應(yīng)注意保持好的水質(zhì)，溶氧應(yīng)盡量保持在5.0毫克/升以上，同時(shí)應(yīng)避免一些應(yīng)激性的操作，如拉網(wǎng)作業(yè)等，以降低病魚(yú)的死亡率。特別注意的是，在魚(yú)病暴發(fā)時(shí)，盡可能地避免拉魚(yú)和運(yùn)魚(yú)。⑥免疫防治。目前，國(guó)外已研制了滅活疫苗、弱毒苗和亞單位苗，試驗(yàn)證明都具有較好的免疫保護(hù)作用。但是，都因?yàn)槌杀据^高或免疫途徑不方便，而沒(méi)有得到很好的推廣與應(yīng)用。有研究結(jié)果表明，在飼料中添加酵母多糖等免疫調(diào)節(jié)劑或?qū)Π唿c(diǎn)叉尾注射多聚次黃甙和胞嘧啶核苷酸(poly I∶C)可以增強(qiáng)斑點(diǎn)叉尾對(duì)CCV的抗感染能力。Vanderheijden等(1996)構(gòu)建了CCV的減毒株疫苗并申請(qǐng)專(zhuān)利；Nusbaum等(2002)將ORF59和ORF6重組構(gòu)建表達(dá)載體疫苗，發(fā)現(xiàn)該疫苗在實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)魚(yú)體有較強(qiáng)的保護(hù)力。我國(guó)迄今為止還沒(méi)有預(yù)防這種疾病的疫苗應(yīng)市。